大仪专题:林木育种与生态修复国家工程研究中心大型仪器公共平台主要设备介绍-系列1

林木育种与生态修复国家工程研究中心大型仪器公共平台位于科研楼二层,集中了15台总价值超过600万元的贵重仪器,配备了功能基因组学、分子标记辅助选择、细胞生物学等林木育种技术研发顶级设备,包括用于遗传、生理、生化、分子生物学方面的实时定量PCR仪、基因芯片扫描系统、荧光万能显微镜、倒置荧光显微镜系统、遗传分析系统、分子影像系统等大型分析仪器设备,主要用于植物生理、生化、分子与细胞水平遗传变异基础研究。

近年来,实验室推行并持续完善大型设备平台全网络预约使用制度,平台所有设备均已纳入北京林业大学大型仪器开放共享平台(http://es.bjfu.edu.cn),严格按照系统预约进行测试,实行模块管理、预约开放、准入考核、安全监管的实验室预约管理体系。加强实验室仪器设备和安全培训,开展大型设备日常管理、培训和开发,每年定期组织荧光显微镜、光合作用仪等大型仪器讲座。

平台主要仪器

01

分子影像系统

型号:LB983 NightOwl Ⅱ

生产厂家:Berthold Technologies公司(德国)

放置地点:科研楼210-3

仪器简介:

分子影像系统即是进行转基因植物鉴定的有效仪器设备。它采用高灵敏度的冷CCD相机,能够检测弱光信号,达到很高的量子率,且背景噪音极小,外加独特设计的暗箱和科学高效的数据处理,使其可以完成无论是发光或者是荧光所涉及到的所有发光标记物的成像分析,可以研究目的基因是在何时、何种刺激下表达,从而实现对目的基因的研究,并可以更早期、更快速的对表达目的基因的植株进行筛选,提高了育种的目的性和精确性。

主要技术指标:

1. CCD尺寸:1.3X1.3cm;像素1024 x 1024 pixel;2. 分辨率:<100um;3. 成像视野:1.0x1.0cm 至 26x26cm多位置放大,视野连续调节,自动对焦;4. 荧光光源:75 W 卤钨灯光源;5. 滤光片: 4个激发光滤光片,4个吸收光滤光片。能检测GFP、Qdots、DsRed、Cy5.5、ICG等;6. 具有鹅颈管荧光照射装置,针对小体积样本或样本局部荧光激发;7. 具有去荧光背景光的功能及连续图像获取功能。

应用范围:

将Luc基因整合到细胞染色体DNA上以表达荧光素酶,这种酶在ATP及氧气的存在条件下,当外源给予其底物荧光素(luciferin),即可在几分钟内产生发光现象。可以研究目的基因是在何时、何种刺激下表达,从而实现对目的基因的研究。与传统的鉴定方法相比具有如下优点:可以更早期、更快速的对表达目的基因的植株进行筛选;高通量、整体的筛选模式在很大程度上缩短了育种周期;提高了育种的目的性和精确性;具有廉价、灵敏、定量和可重复性的检测特性;标记方法简单,对环境无污染

收费标准:平台内:30/h,校内:60/h, 校外:120/h

02

多功能基因芯片扫描系统

型号:Typhoon Trio+

生产厂家:GE公司(美国)

放置地点:科研楼210-3

仪器简介:

Typhoon Trio+多功能基因芯片扫描系统是一台多功能激光扫描成像系统,可以检测多色荧光、磷屏、化学发光等,能够有效检测各种样品:PCR产物、2-D蛋白质电泳凝胶、膜阵列、微阵列、印迹、微孔板及组织切片等等。Typhoon Trio+拥有10微米高分辨率检测功能,其扫描面积大(35×43cm)并且其平台是密封的,可以扫描各种样品,不论是厚的,薄的,湿的或是干的,不同样品不需要更换样品盘,操作方便,最大程度适用于各种实验样品成像检测。

主要技术指标:

1. 扫描面积:35 x 43 cm;

2. 像素大小(分辨率):1000, 500, 200, 100, 50, 25, 10微米可选;

3.激光光源:绿色光源:20mW 固态双频SYAG激光,波长:532nm;红色光源:10mW 氦氖激光,波长:632.8nm;蓝色光源 : 20mW 固体激光器,波长:488nm;

4.滤光片:6个发射滤光片:520BP40,555BP20,580BP30,610BP30, 670BP30,526SP;自动切换滤光片,不需手工更换

应用范围:

Typhoon Trio+系统可以方便地进行多色荧光、化学发光、磷屏放射自显影、微阵列成像实验。可有效开展以下方面的研究:1. EMSA蛋白质-核酸的结合检测;2. ECL plus检测 western blot;3.多通道荧光western blot;4.克隆子测序前检测;5.高通量筛选转基因植物;6.荧光差异双向电泳-Biomaker筛选;7.蛋白质靶点研究;8.菌株筛选;9.药物代谢,药物动力学等等。

收费标准:平台内:100/h,校内:200/h,校外:400/h

03

实时定量基因扩增仪PCR

仪器型号:7500 FAST

生产厂家:Thermo Fisher公司(美国)

放置地点:科研楼210-3

仪器简介:

7500Fast 实时荧光定量PCR仪,使用卤钨灯作为激发光源,CCD同时成像,可同时检测5色荧光;具有快速模式,40min内完成40循环的定量PCR试验。实时定量PCR仪是特异性靶基因检测与定量的一体化平台, 它将PCR热循环,荧光检测和各种应用分析软件结合在一起,可以动态观察PCR每一循环各反应管中PCR扩增产物逐渐增加的情况。PCR实验结束后可以马上得到定量结果,无需凝胶电泳分析,无需纯化PCR产物,无需进行任何实验操作。

主要技术指标:

1.样品通量:96孔x0.1 mL;2.反应体积:10~30μL;3.支持的耗材:0.1mL 96孔反应板与光学盖膜、0.1 mL96孔反应板与光学平盖、0.1 mL 8连管与光学平盖、0.1 mL单管与光学平盖;4. PCR完成运行时间:<30分钟运行。

应用范围:

实时定量PCR应用广泛,包括基于相对定量分析的基因表达分析,以标准曲线为基础的样本绝对定量分析,定性的PCR扩增后核酸序列的SNP基因型分析,以及以阳性内对照为基础的阳性/阴性结果判定等。

收费标准:平台内:30/h,校内:60/h,校外:200/h。

04

荧光万能显微镜

型号:BX61

生产厂家:奥林巴斯公司(日本)

放置地点:科研楼210-1

主要技术指标:

1. 可作明场(BF)、荧光(FL,蓝/绿/紫外激发)、微分干涉(DIC)、简易偏光的观察;

2. 物镜:万能平场复消色差物镜:10X(N.A. 0.40,W.D. 3.1)、20X(N.A. 0.75,W.D. 0.6 )、40X(N.A0.95,W.D. 0.18)、60X(N.A. 0.9,W.D. 0.23)、100X(N.A. 1.4,W.D.0.13 oil);

3. 物镜转换器:微分干涉衬比法/简易偏光用六孔电动换镜转盘;

4. 聚光镜:8孔电动万能聚光镜,可完成DIC、BF;

5. 微分干涉系统:10X、20X、40X、60X、100X物镜的DIC环板;

应用范围:

荧光万能显微镜主要用于细胞等活体组织的荧光、相差观察。适应生物学领域中的组织培养、组织切片、植物细胞、动物细胞离体培养等显微观察。

收费标准:平台内:30/h,校内:40/h,校外:150/h。

05

倒置荧光显微镜系统

型号:FSX100

生产厂家:奥林巴斯公司(日本)

仪器简介:

主要技术指标:

1、观察模式:明场/相差/荧光

2、3个荧光通道;一个透射相差通道。6孔位电动荧光激发块转盘,荧光激发块:紫外、蓝色、绿色。

3、 采集模式:单张 / TIMELAPSE(时间序列)/ Z轴序列/拼图;自动多荧光(相差)通道Z轴序列扫描:步进:0.1 — 10 um;最大采集厚度:300 um;采集图像数量:2 — 500

4、自动拼图功能:在宏观图像中定义拼图区域,可以拼接区域又3x3和5x5两种;图像放大范围是:0.5—2x

5、电动物镜转盘:万能超级复消色差物镜 10X N.A. 0.4, W.D. 3.1mm;万能超级复消色差物镜 40X N.A. 0.95, W.D. 0.18mm

6、电动透射光聚光镜:N.A ≥0.55;电动连续高通透光学放大系统范围: 0.42-2x连续变倍

7、电动扫描台扫描范围:56mm(水平)X26mm(垂直);最大移动速度:10mm/s; 35mm培养皿:可以离开中心11x11mm的方形区域;对于塑料培养皿可以实现:18x18mm的区域;50mm的培养皿样本夹:可以实现离开中心18x18mm的方形区域。

应用范围:

可用于微生物学和寄生虫学:细菌、寄生虫形态结构;遗传学和组胚学:细胞生长、分化、成熟变化;细胞生物学:细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡以及生理学/药理学/生物化学/神经生物学等涉及形态方面的研究和分析。